Datorită dezvoltării medicinei moderne, atunci când face un diagnostic, un medic nu mai trebuie să se concentreze asupra manifestărilor indirecte ale bolilor sau să efectueze teste de laborator în mai multe etape. Este suficient să efectuați o singură analiză care va confirma sau infirma presupusul diagnostic inițial.
Această metodă este testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) - acest studiu vă permite să detectați anticorpi și antigeni specifici caracteristici diferitelor patologii, ceea ce accelerează foarte mult diagnosticul.
Analiza ELISA este un test (metodă) de laborator care ajută la determinarea prezenței sau absenței anumitor anticorpi în organism pentru a lupta împotriva virusului și a cantității acestora.
Baza studiului este antigenul de reacție naturală (un obiect dăunător pentru organism) - anticorp (o proteină care distruge obiectele dăunătoare), ceea ce face posibilă detectarea prezenței diferitelor viruși și bacterii.
ELISA este un răspuns imun natural al organismului - interacțiunea unui anticorp cu antigenul corespunzător. Deci, în timpul ELISA, antigenele sau anticorpii sunt adăugați unul câte unul într-o eprubetă cu materialul, după care se determină concentrația complexelor antigen-anticorp rezultate.
Dacă se formează potriviri, atunci apar complexe imune, atunci are loc o reacție enzimatică a colorantului cu molecula combinată. Datorită schimbării de culoare în timpul indicației enzimatice, boala este identificată după examinarea nivelului compusului determinat.
Tipuri de imunoglobuline
Imunoglobulinele umane sunt diferențiate în mai multe clase care diferă unele de altele prin proprietățile, structura și caracteristicile antigenice ale lanțurilor grele (lanțul H). Toate mamiferele, inclusiv oamenii, au cinci lanțuri H, care determină apartenența imunoglobulinelor la clasa corespunzătoare: G, M, A, D, E.
Fiecare clasă diferă una de cealaltă în proprietățile biologice și capacitatea de a lega antigenele, precum și viteza și puterea conexiunii cu molecula.
Funcțiile fiecărei imunoglobuline (Ig) sunt diferite:
| Cantitatea din organism | Funcții | Timp de înjumătățire (zile) | Sens | |||||||||||||||||||||||||||
| G | 70% | Formează imunitate pasivă la nou-născut; necesare pentru răspunsul imun îmbunătățește fagocitoza, | 21-24 | asigură imunitate umorală pe termen lung împotriva bolilor infecțioase | ||||||||||||||||||||||||||
| M | 5-10% | necesare pentru a activa fagocitoza, capabil să lege 5 molecule de antigen, | 5 | Oferă răspunsul imun primar | ||||||||||||||||||||||||||
| A | 10-15 | Neutralizează toxinele și virușii necesare pentru formarea imunității timpurii Apariția imunoglobulinelor are loc de-a lungul unui „lanț” particular - lgM lgG, așa reacționează organismul la apariția unui antigen în organism. În timpul diagnosticului de laborator, se evaluează concentrația a trei imunoglobuline principale - G, M, A. Indicații pentru testarea imunoglobulineiAnaliza ELISA devine din ce în ce mai populară în fiecare an. Un astfel de studiu accelerează diagnosticul, iar acest lucru este foarte important pentru tratamentul patologiilor precum:
ELISA este un marker unic al patologiilor autoimune și al neoplasmelor maligne. Pregătirea pentru testCând vă pregătiți pentru studiu, ar trebui să respectați următoarele reguli: Medicii recomandă, de asemenea, aderarea la o dietă specială - excluzând alimentele grase și prăjite, iar dacă testul este efectuat pentru hepatită, atunci este necesar să nu consumați legume portocale și în special fructe citrice. Ar trebui să donezi sânge dimineața pe stomacul gol. Analiza fals pozitivă apare din cauza recomandărilor neîndeplinite, în special a consumului de alimente grase, ceea ce duce la o concentrație prea mare de trigliceride în plasmă, ceea ce determină scăderea conductibilității ELISA. Procedura de colectare a probelorCa material de testat se poate folosi sânge integral, ser sau plasma sanguină venoasă. Materialul se recoltează, de obicei din vena ulnară, folosind un ac de unică folosință și un tub cu vid; sunt necesari 5-10 ml de sânge. Pentru a asigura acuratețea rezultatului, este important să respectați tehnica corectă de prelevare a probelor - puncția vasului în sine și a țesuturilor din jur trebuie efectuată într-o singură manipulare, prin urmare se folosește un ac scurt cu un diametru mare, astfel încât peretele opus al venei nu este rănit și celulele roșii din sânge nu sunt deteriorate.
În timpul depozitării materialului, trebuie evitată posibila ionizare; în plus, materialul nu trebuie să intre în contact cu dezinfectanți reziduali, prin urmare se folosește doar un tub de plastic de unică folosință, marcat cu numele pacientului, data și ora livrării materialului. Dacă este necesară depozitarea pe termen scurt a materialului de testat, atunci se folosește o cameră frigorifică cu o temperatură de 2-4 ° C, dacă este necesară o păstrare mai lungă, atunci materialul este congelat la o temperatură de -20 ° C. Cum se face analizaDupă pregătirea materialului studiat, asistentul de laborator începe manipulările necesare. În acest scop, sunt utilizate o serie de seturi speciale de antigene, care au capacitatea de a provoca răspunsul organismului la un iritant, acestea sunt diverse infecții, hormoni și alergeni. Reacția antigen-anticorp așteptată arată cam așa:
În prezent, au fost dezvoltate multe opțiuni ELISA diferite, dar nu există o clasificare clară a acestora. De obicei, metodele sunt considerate pe baza împărțirii lor în hetero- și omogene - toate fazele analizei au loc folosind o fază solidă sau folosind doar o soluție. Laboratoarele moderne de diagnostic clinic utilizează de obicei ELISA eterogen (în fază solidă), în care faza solidă înseamnă absorbția de antigene sau anticorpi pe suprafața solidă a godeurilor speciale situate pe o microplacă de polistiren; metoda este împărțită în ELISA directă și indirectă. Cu ELISA direct, antigenul introdus este fixat în timpul procesului de incubare pe suprafața godeurilor goale; pentru aceasta, materialul de testat este plasat în godeuri curate timp de 20-25 de minute, acest lucru este necesar pentru ca antigenul să se atașeze la suprafața acestora. După aceasta, se adaugă anticorpul necesar. Apoi, materialul rămâne un anumit timp pentru a forma legături. Anticorpii sunt întotdeauna adăugați în exces, așa că, chiar dacă sunt prezenți, antigenele nelegate rămân în probă și, dacă nu există deloc antigene, atunci nu vor exista conexiuni. Pentru a elimina anticorpii „în plus”, se efectuează decantarea, după care rămân doar acei anticorpi care au creat o legătură cu antigenul.
În metoda ELISA indirectă se folosesc anticorpi care sunt precombinați cu substratul reacției enzimatice; în acest caz, legătura anticorpilor cu antigenul are loc în timpul procesului de incubare, după care are loc mobilizarea legăturilor la suprafața godeurilor, iar conjugatul și reactivul substrat-cromogen adăugat ulterior colorează reacția. Astfel, principala diferență între metodele indirecte și cele directe nu este aderența materialului la suprafața godeurilor curate, ci legarea de antigenul imobilizat pe placă. Reacția este oprită folosind dispozitive specializate, apoi fiecare godeu este supus unui proces fotometric, urmat de o descriere comparativă a rezultatului obținut cu probele de control efectuate anterior. Dacă în probă este detectată o creștere a densității optice, atunci concentrația de anticorpi specifici din rezultatul testului este de asemenea supraestimată. Când va fi gata analiza?Studiul nu durează mult timp; de la prelevarea de sânge până la primirea rezultatului, durează de la 1 până la 10 zile, în funcție de măsurile de diagnosticare. Rezultatele testelor și interpretarea acestoraFormularul de rezultat diagnostic primit de pacient indică un rezultat negativ sau pozitiv pentru anumite clase de imunoglobuline și este indicat și un indicator cantitativ al diferitelor clase de anticorpi. Sunt posibile diverse interpretări ale rezultatelor:
Deci, de exemplu, dacă IgG și IgM au fost detectate, atunci pacientul poate avea una dintre următoarele boli:
Imunotestul enzimatic este adesea prescris pentru studii hormonale; normele sunt prezentate în tabel:
Analiza ELISA este un test de diagnostic care vă permite să evaluați probabilitatea formării patologiilor oncologice. Cu toate acestea, interpretarea rezultatelor este efectuată numai de medicul curant. Înțeles test resultsELISA este potrivit pentru detectarea diferitelor forme de infecții cu transmitere sexuală, inclusiv sifilisul, și este adesea folosit pentru screening-ul femeilor însărcinate. Datorită acestui studiu, puteți afla cu cât timp în urmă a apărut infecția și stadiul bolii la momentul studiului:
În timpul studiului, godeurile de pe placă cu un indicator negativ rămân incolore, iar cele pozitive devin galbene strălucitoare. Dacă culoarea godeurilor pozitive nu se potrivește cu culoarea controlului, atunci rezultatul este considerat discutabil și este necesar un test repetat. Imunotestul enzimatic este primul pas în diagnosticarea HIV. Analiza nu poate fi efectuată imediat după infecția suspectată; este necesar să așteptați până la sfârșitul perioadei de incubație (de la 14 zile la 6 luni). În timpul analizei se determină anticorpi la HIV-1 și HIV-2, se caută anticorpi de clasa G, care de obicei apar într-o etapă ulterioară, iar anticorpii de clasa A și M sunt detectați în stadiile incipiente (în perioada de incubație).
ELISA este, de asemenea, folosit ca test de diagnostic pentru tuberculoză, dar chiar dacă pacientul are anticorpi la această patologie, acest lucru nu confirmă întotdeauna prezența tuberculozei, astfel încât ELISA este adesea folosit ca tehnică de clarificare, sau pentru a diagnostica o formă extrapulmonară latentă. IgG - stadiul cronic al invaziei |
||||||||||||||||||||||||||||
| IgA – infecția a apărut cu mai bine de 30 de zile în urmă | ||||||||||||||||||||||||||||||
| IgG – invazia este în faza acută | ||||||||||||||||||||||||||||||
| IgG – confirmă diagnosticul și arată eficacitatea terapiei |
Avantajele și dezavantajele analizei
ELISA are multe avantaje, ceea ce explică popularitatea sa în rândul medicilor și pacienților, acestea sunt:
- precizie ridicată a rezultatelor,
- preț accesibil,
- rezultat rapid,
- identificarea stadiului bolii,
- controlul bolii în timp.
Cu toate acestea, alături de avantaje, există și un dezavantaj - în cazuri rare, analiza poate fi fals pozitivă sau fals negativă.
De ce rezultatul poate fi nesigur
Ca urmare, erorile pot apărea din cauza încălcărilor tehnice; analiza poate fi, de asemenea, nesigură la persoanele cu anumite boli cronice (factorul reumatoid), care se caracterizează prin producerea de anticorpi specifici.
Rezultatul final este influențat și de utilizarea de către pacient a medicamentelor și a tulburărilor metabolice. Din aceste motive, un rezultat pozitiv pentru HIV și oncopatologie necesită probe repetate.
Costul studiului
Prețul ELISA variază în funcție de direcția diagnosticului (RUB):
- hepatită 250 -900;
- virusuri – 250 -1000;
- HIV – 250-350;
- infestări helmintice – 280 – 900;
- sifilis -150-250;
- infecții fungice 400-500.
Format articol: Lozinsky Oleg
Video despre analiza ELISA
Cum se efectuează analiza ELISA:
În prezent, se acordă o atenție deosebită diagnosticării HIV (virusul imunodeficienței) la om. Detectarea bolii într-un stadiu incipient va ajuta la începerea cursului de tratament mai devreme și acest lucru va afecta semnificativ creșterea vieții pacientului.
După efectuarea unui test HIV, rezultatele sunt de obicei fie pozitive, fie negative. În acest caz, există un diagnostic primar și unul secundar.În timpul testării primare, o persoană este testată folosind ELISA. Dacă este necesar, se repetă un test de sânge pentru HIV. Ce înseamnă un rezultat pozitiv și negativ? Cum este descifrat testul HIV? De ce o persoană care nu este dependentă de droguri sau alcoolică, dar are un partener sexual obișnuit, dă un rezultat pozitiv, dar discutabil când citește un test de virus al imunodeficienței?
Despre HIV
Agenții cauzali ai bolii sunt tipurile 1 și 2. Pentru o perioadă lungă de timp, prezența lor la om trece neobservată; apoi, în primul rând, este afectat sistemul imunitar, apoi alte sisteme umane.
Principala metodă de diagnostic de laborator a virusului imunodeficienței este detectarea anticorpilor la HIV. Testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) este baza metodei; este sensibil (99,5% și mai mult) și specific (99,8% și mai mult). În plus, la diagnosticarea HIV, antigenul p24 este determinat folosind ELISA.
Fiecare sistem de testare are indicatori diferiți; prin urmare, ei determină structuri proteice diferite ale învelișurilor virale. Agenții cauzali ai HIV vin în două subtipuri: 1 și 2 sau HIV-1 și HIV-2. Particulele virale apar ca o formă sferică cu un înveliș exterior de fosfolipide. Pentru subtipul 1, are următoarea greutate moleculară: gp120, gp41, gp160. Al doilea subtip conține gp105, gp36, gp140. Pentru învelișul interior al virusului, este cunoscută și greutatea moleculară. Pentru subtipul 1 acesta este p55, p17, p24. Pentru al 2-lea - p16, p25, p55.
Pentru fiecare sistem de testare pentru a detecta un virus, există trei seturi principale de proteine.
În general, rezultatul ELISA poate fi:
- negativ;
- fals pozitiv;
- fals negativ;
- îndoielnic sau incert.
Metodele de diagnostic identifică antigenele și anticorpii.
Despre rezultat normal
Norma - ce înseamnă? Când testul HIV este negativ, acest lucru este considerat normal.
1. Ultima generație de sisteme de testare ELISA vă permite să determinați prezența anticorpilor la HIV și a particulelor de proteine. Dacă analiza este normală, atunci nu se găsesc anticorpi sau particule proteice ale agentului patogen în sânge. Dar se poate spune cu siguranță că o persoană este sănătoasă pe baza acestui lucru dacă nu a existat niciun risc de infecție timp de 3 luni înainte de test. În caz contrar, după ceva timp, trebuie să repetați testele.
Au fost cazuri în care HIV a fost descoperit abia după 6 luni. Prin urmare, dacă rezultatul este negativ și a existat contact cu un pacient infectat cu HIV, pentru fiabilitate este necesar să se repete testele după trei, patru și șase luni. Se întâmplă ca ELISA să dea un rezultat negativ, dar o persoană suspectează clar prezența semnelor HIV, apoi se recomandă să faceți din nou testul. Un rezultat eronat este posibil din cauza momentului timpuriu al analizei sau din cauza factorului uman.
2. Dacă rezultatul este negativ folosind imunoblot, atunci aceasta este în prezent cea mai fiabilă analiză.
Dacă o persoană are virusul imunodeficienței, iar rezultatul este negativ, atunci cel mai probabil aceasta este o eroare medicală, care poate apărea în orice etapă a testului. Dacă, la repetarea imunoblotului după trei și șase luni, rezultatul este negativ, atunci nu este nimic de care să vă faceți griji, aceasta indică norma. Și numai după un răspuns negativ imunoblot va fi eliberat un certificat care să ateste că testul HIV este negativ.
3. Testarea PCR la adulți este folosită extrem de rar la diagnosticarea virusului imunodeficienței, iar această metodă este folosită pentru copiii nou-născuți.
Un rezultat negativ este, de asemenea, considerat norma aici.
4. Conform cercetărilor sociologice, mulți oameni folosesc testarea rapidă HIV. Când văd o linie negativă, oamenii se calmează și refuză să meargă la o unitate medicală, chiar dacă au toate semnele infecției cu HIV. Dar trebuie să știți că acuratețea testului rapid este de optzeci și cinci la sută. În plus, acasă îl puteți efectua incorect, sau condițiile de depozitare vor fi încălcate. Există o șansă și mai mare ca rezultatul să fie incorect. Chiar și consumul de apă minerală alcalină cu 8 ore înainte de testare va afecta rezultatul testului. Prin urmare, faptul că o persoană nu are virusul imunodeficienței pe baza unui test rapid, chiar dacă acesta este negativ, nu este întotdeauna o afirmație adevărată.
transcrierea analizei
După ce oamenii au fost testați, apare adesea întrebarea cum să descifrem rezultatul testului și ce să faceți dacă se obține un rezultat pozitiv pentru HIV.
1. Dacă ELISA a arătat prezența tuturor sau aproape a tuturor anticorpilor la antigene conform acestui sistem de testare, aceasta înseamnă un test pozitiv pentru HIV. Dacă răspunsul după al doilea imunotest serologic enzimatic este pozitiv, atunci trebuie efectuată imunoblotting. Descifrarea rezultatelor sale va fi mai precisă. Dacă imunotestul enzimatic a dat un rezultat pozitiv, următoarea analiză de imunoblot a arătat și prezența HIV, atunci este dat rezultatul final. Când testele sunt descifrate, trebuie să știți că un test HIV pozitiv este determinat de:
- 60% până la 65% la 28 de zile după infecție;
- în 80% - după 42 de zile;
- în 90% - după 56 de zile;
- în 95% - după 84 de zile.
Dacă răspunsul la HIV este pozitiv, aceasta va însemna că au fost detectați anticorpi împotriva virusului. Pentru a evita un răspuns fals pozitiv, trebuie să faceți din nou testele, de preferință de două ori. Dacă anticorpii împotriva imunodeficienței sunt detectați la trecerea a două teste din două sau la trecerea a 3 teste la 2 dintre ele, atunci rezultatul este considerat pozitiv.
Antigenul p 24 poate fi detectat în sânge în decurs de 14 zile de la data infecției. Folosind metoda imunoenzimatică, acest antigen este detectat între 14 și 56 de zile. După 60 de zile nu mai este în sânge. Numai când SIDA se formează în organism, această proteină p24 crește din nou în sânge. Prin urmare, sistemele de testare imunoenzimatică sunt utilizate pentru a detecta HIV în primele zile de infecție sau pentru a determina modul în care boala progresează și pentru a monitoriza procesul de tratament. Sensibilitatea analitică ridicată a imunotestului enzimatic detectează antigenul p24 în materialul biologic pentru HIV al primului subtip într-o concentrație de 5 până la 10 pkg/ml, pentru HIV din al doilea subtip de la 0,5 ng/ml sau mai puțin.
2. Un rezultat discutabil al unui imunotest enzimatic înseamnă că a existat o greșeală undeva în diagnostic, de regulă, ceva a fost amestecat de lucrătorii medicali sau persoana are semne de infecție, dar rezultatul este negativ, ceea ce ridică suspiciuni, iar persoana este trimisă pentru un test repetat.
3. Un rezultat fals pozitiv se înțelege ca rezultat atunci când analizele de sânge au fost efectuate în următoarele condiții ale pacientului:
- sarcina;
- dacă o persoană are dezechilibru hormonal;
- cu imunosupresie prelungită.
Cum să descifrem analiza în acest caz? Un rezultat fals pozitiv este dat dacă este detectată cel puțin o proteină.
Datorită faptului că antigenul p24 este foarte dependent de variațiile individuale, folosind această metodă, în prima perioadă de infecție, sunt depistați de la 20% până la 30% dintre pacienți.
Despre indicatorii după studiul folosind metoda reacției în lanț a polimerazei
Folosind această metodă, ARN-ul și ADN-ul HIV sunt detectați aproape imediat după infectare. Dar nu se pune un diagnostic final; este necesară confirmarea obligatorie prin alte metode. „Ajută-mă să descifrez rezultatul PCR.” - destul de des poți auzi o astfel de cerere. Ce scrie în acest caz dacă este detectat un virus al imunodeficienței? Când se răspunde la rezultatul unei analize efectuate folosind PCR, este indicat numărul de copii de ARN per mililitru de sânge. Tabelul de mai jos arată rezultatul în funcție de caracteristicile cantitative din sânge.
Este bine să utilizați tabelul de mai sus atunci când testați pentru SIDA, deoarece poate fi utilizat cu ușurință pentru a determina stadiul bolii.
Aceste tabele, ținând cont de diferite sisteme de testare, sunt disponibile în sălile de laborator pentru fiecare metodă de imunotest enzimatic și imunoblot.
Ei sunt adesea întrebați: „Descifrați răspunsul după un studiu de reacție în lanț a polimerazei folosind indicatorul CD4.” Numărul normal de celule CD4 este de la 600 la 1900 de celule per mililitru de material biologic. Aceasta corespunde statutului HIV negativ. Dar trebuie să știți că acești indicatori, chiar și la oamenii sănătoși, nu sunt în acest interval.
În lumea modernă, multe laboratoare au deja echipamente bune cu care puteți examina complet organismul pentru infecția cu HIV.
In contact cu
Diagnosticul în timp util al infecției cu HIV devine o măsură extrem de importantă, deoarece inițierea timpurie a tratamentului poate determina în mare măsură dezvoltarea ulterioară a bolii și poate prelungi viața pacientului. În ultimii ani, s-au înregistrat progrese semnificative în identificarea acestei boli groaznice: sistemele de testare mai vechi sunt înlocuite cu altele mai avansate, metodele de examinare devin din ce în ce mai accesibile, iar acuratețea lor crește semnificativ.
În acest articol vom vorbi despre metode moderne de diagnosticare a infecției cu HIV, cunoașterea cărora este utilă pentru tratarea în timp util a acestei probleme și pentru menținerea unei calități normale a vieții pacientului.
Metode de diagnosticare HIV
În Rusia, se efectuează o procedură standard pentru a diagnostica infecția cu HIV, care include două niveluri:
- Sistem de testare ELISA (analiza screening);
- imunoblot (IB).
Pentru diagnosticare pot fi utilizate și alte metode:
- teste rapide.
Sisteme de testare ELISA
În prima etapă a diagnosticului, un test de screening (ELISA) este utilizat pentru a detecta infecția cu HIV, care se bazează pe proteinele HIV create în laboratoare care captează anticorpi specifici produși în organism ca răspuns la infecție. După interacțiunea lor cu reactivii (enzimele) sistemului de testare, culoarea indicatorului se schimbă. În continuare, aceste modificări de culoare sunt procesate cu ajutorul unor echipamente speciale, care determină rezultatul analizei efectuate.
Astfel de teste ELISA pot arăta rezultate în câteva săptămâni de la introducerea infecției cu HIV. Acest test nu determină prezența virusului, ci detectează producția de anticorpi împotriva acestuia. Uneori, în corpul uman, producția de anticorpi împotriva HIV începe după 2 săptămâni de la infectare, dar la majoritatea oamenilor aceștia sunt produși la o dată ulterioară, după 3-6 săptămâni.
Există patru generații de teste ELISA cu sensibilități diferite. În ultimii ani, au fost din ce în ce mai utilizate sisteme de testare de generația a treia și a patra, care se bazează pe peptide sintetice sau proteine recombinate și au o specificitate și o precizie mai mare. Acestea pot fi utilizate pentru a diagnostica infecția cu HIV, pentru a monitoriza prevalența HIV și pentru a asigura siguranța la testarea sângelui donat. Precizia sistemelor de testare ELISA din generațiile III și IV este de 93-99% (testele produse în Europa de Vest sunt mai sensibile - 99%).
Pentru a efectua un test ELISA, se prelevează 5 ml de sânge din vena pacientului. Între ultima masă și analiză trebuie să treacă cel puțin 8 ore (de obicei se face dimineața pe stomacul gol). Se recomandă efectuarea unui astfel de test nu mai devreme de 3 săptămâni de la infecția suspectată (de exemplu, după un contact sexual neprotejat cu un nou partener sexual).
Rezultatele testului ELISA se obțin în 2-10 zile:
- rezultat negativ: indică absența infecției cu HIV și nu necesită contactarea unui specialist;
- rezultat fals negativ: poate fi observat în stadiile incipiente ale infecției (până la 3 săptămâni), în stadiile ulterioare ale SIDA cu suprimarea severă a sistemului imunitar și cu pregătirea necorespunzătoare a sângelui;
- rezultat fals pozitiv: poate fi observat în unele boli și în caz de pregătire necorespunzătoare a sângelui;
- rezultat pozitiv: indică infecția cu HIV, necesită efectuarea unui IB și contactarea pacientului cu un specialist la centrul SIDA.
De ce poate un test ELISA să dea rezultate fals pozitive?
Rezultatele fals pozitive ale testelor HIV ELISA pot apărea din cauza procesării necorespunzătoare a sângelui sau la pacienții cu următoarele afecțiuni și boli:
- mielom multiplu;
- boli infecțioase cauzate de virusul Epstein-Barr;
- stare dupa ;
- boală autoimună;
- pe fundalul sarcinii;
- starea după vaccinare.
Din motivele descrise mai sus, anticorpii nespecifici cu reacție încrucișată pot fi prezenți în sânge, a căror producție nu a fost provocată de infecția cu HIV.
În ultimii ani, frecvența rezultatelor fals pozitive a scăzut semnificativ datorită utilizării sistemelor de testare din generația III și IV, care conțin peptide mai sensibile și proteine recombinante (sunt sintetizate prin inginerie genetică in vitro). După introducerea unor astfel de teste ELISA, frecvența rezultatelor fals pozitive a scăzut semnificativ și este de aproximativ 0,02-0,5%.
Un rezultat fals pozitiv nu înseamnă că persoana este infectată cu HIV. În astfel de cazuri, OMS recomandă efectuarea unui alt test ELISA (neapărat generația IV).
Sângele pacientului este trimis la un laborator de referință sau de arbitraj cu marcajul „repetare” și testat folosind un sistem de testare ELISA de generația IV. Dacă rezultatul noii analize este negativ, atunci primul rezultat este considerat eronat (fals pozitiv) și IS nu este efectuat. Dacă rezultatul este pozitiv sau discutabil în timpul celui de-al doilea test, pacientul trebuie să fie supus IB după 4-6 săptămâni pentru a confirma sau infirma infecția cu HIV.
Blotting imun
Un diagnostic definitiv de infecție cu HIV poate fi pus doar după obținerea unui rezultat pozitiv al imunoblotării (IB). Pentru a-l realiza, se folosește o bandă de nitroceluloză, pe care se aplică proteine virale.
Prelevarea de sânge pentru IB se efectuează dintr-o venă. În continuare, suferă o prelucrare specială, iar proteinele conținute în serul său sunt separate într-un gel special în funcție de sarcina și greutatea moleculară a acestora (manipularea se realizează folosind echipamente speciale sub influența unui câmp electric). Pe gelul de ser sanguin se aplică o bandă de nitroceluloză și se efectuează blotting („blotting”) într-o cameră specială. Banda este procesată și dacă materialele folosite conțin anticorpi împotriva HIV, aceștia se leagă de benzile antigenice de pe IB și apar ca linii.
IB este considerat pozitiv dacă:
- conform criteriilor americane CDC - există două sau trei linii gp41, p24, gp120/gp160 pe bandă;
- conform criteriilor FDA americane, banda are două linii p24, p31 și o linie gp41 sau gp120/gp160.
În 99,9% din cazuri, un rezultat pozitiv IB indică infecția cu HIV.
Dacă nu există linii, IB este negativ.
La identificarea liniilor cu gr160, gr120 și gr41, IB este îndoielnic. Acest rezultat poate apărea atunci când:
- boli oncologice;
- sarcina;
- transfuzii de sânge frecvente.
În astfel de cazuri, se recomandă repetarea studiului folosind un kit de la o altă companie. Dacă după IB suplimentar rezultatul rămâne îndoielnic, atunci observarea este necesară timp de șase luni (IB se efectuează la fiecare 3 luni).
Reacția polimerazei în lanț
Un test PCR poate detecta ARN-ul virusului. Sensibilitatea sa este destul de mare și permite detectarea infecției cu HIV în 10 zile de la infectare. În unele cazuri, PCR poate da rezultate fals pozitive, deoarece sensibilitatea sa ridicată poate răspunde și la anticorpii la alte infecții.
Această tehnică de diagnosticare este costisitoare și necesită echipamente speciale și specialiști cu înaltă calificare. Aceste motive nu fac posibilă efectuarea de teste în masă a populației.
PCR este utilizată în următoarele cazuri:
- depistarea HIV la nou-născuții născuți din mame infectate cu HIV;
- pentru a detecta HIV în „perioada fereastră” sau în caz de IB îndoielnic;
- pentru a controla concentrația HIV în sânge;
- pentru studiul sângelui donatorului.
Testul PCR singur nu pune un diagnostic de HIV, ci este efectuat ca o metodă suplimentară de diagnosticare pentru a rezolva situațiile controversate.
Metode exprese
Una dintre inovațiile în diagnosticarea HIV sunt testele rapide, ale căror rezultate pot fi evaluate în 10-15 minute. Cele mai eficiente și precise rezultate se obțin cu ajutorul testelor imunocromatografice bazate pe principiul fluxului capilar. Sunt benzi speciale pe care se aplică sânge sau alte fluide de testare (salivă, urină). Dacă sunt prezenți anticorpi împotriva HIV, după 10-15 minute pe test apare o bandă colorată și de control - un rezultat pozitiv. Dacă rezultatul este negativ, apare doar banda de control.
Ca și în cazul testelor ELISA, rezultatele testelor rapide trebuie confirmate prin analiza IB. Numai după aceasta se poate face un diagnostic de infecție cu HIV.
Sunt disponibile kituri de testare rapidă acasă. Testul OraSure Technologies1 (SUA) este aprobat de FDA, disponibil la ghișeu și poate fi folosit pentru a detecta HIV. După test, dacă rezultatul este pozitiv, pacientului i se recomandă să fie supus unei examinări la un centru specializat pentru confirmarea diagnosticului.
Alte teste pentru uz casnic nu au fost încă aprobate de FDA și rezultatele lor pot fi foarte discutabile.
În ciuda faptului că testele rapide sunt inferioare ca precizie față de testele ELISA de generația IV, acestea sunt utilizate pe scară largă pentru testarea suplimentară a populației.
Puteți face teste pentru depistarea infecției cu HIV la orice clinică, spital central raional sau centre specializate SIDA. Pe teritoriul Rusiei, acestea se desfășoară în mod absolut confidențial sau anonim. Fiecare pacient se poate aștepta să primească consult medical sau psihologic înainte sau după test. Nu va trebui să plătiți decât pentru testele HIV în instituțiile medicale comerciale, în timp ce în clinicile publice și spitalele acestea se efectuează gratuit.
Citiți despre modalitățile prin care vă puteți infecta cu HIV și ce mituri există despre posibilitățile de a vă infecta.
HIV este flagelul generației noastre. Ce metode există pentru diagnosticarea HIV, informații aprofundate despre testul ELISA pentru HIV. Cum să o luați, cum să interpretați rezultatele analizei.
Virusul imunodeficienței umane este una dintre cele mai teribile infecții pentru generația noastră.
HIV are un efect distructiv asupra sistemului nostru imunitar, iar dacă progresul bolii nu este oprit la timp, acesta se poate transforma în sindrom de imunodeficiență dobândită. HIV se răspândește prin contactul direct între parteneri în timpul actului sexual prin organele genitale masculine și feminine. O altă cauză a infecției poate fi intrarea virusului în sânge. Acest lucru se întâmplă din cauza utilizării instrumentelor sterile, a transfuziei de sânge contaminat și chiar de-a lungul generațiilor: la un copil de la o mamă infectată în timpul alăptării.
Până acum, oamenii de știință din întreaga lume își frământă creierul pentru a crea o nouă generație de medicamente care poate vindeca SIDA, cu toate acestea, în ciuda ritmului rapid al progresului științific, virusul imunodeficienței umane continuă să se răspândească pe întreaga planetă.
ELISA – o metodă de diagnosticare a HIV
Oamenii de știință din generația secolului al XX-lea au dezvoltat mai multe metode de diagnosticare a HIV, dintre care cea mai importantă este considerată test imunosorbent legat. ELISA HIV a început să fie efectuat relativ recent - la începutul anilor nouăzeci. De-a lungul timpului, metoda a fost rafinată și a dobândit noi detalii. Acum fiabilitatea metodei ELISA este una dintre cele mai ridicate - aproximativ 98%. Prin urmare, această metodă este folosită din ce în ce mai des.
ELISA este primul test pe care un pacient îl întâlnește atunci când testează HIV. Metoda ELISA determină prezența anticorpilor în sânge. Dacă testul constată prezența anticorpilor în sânge, atunci virusul este prezent. Cu toate acestea, informațiile despre acest test trebuie susținute de alte teste, precum imunoblot (IB) și metoda de ultimă generație - reacția în lanț a polimerazei (PCR).
Anticorpii sunt compuși proteici speciali care sunt produși de celulele plasmatice ca reacție la o infecție care intră în organism (anticorpii încep să se formeze la 1-2 luni după infecție).
Cauzele HIV
Medicul dumneavoastră vă va trimite o recomandare pentru testare dacă ați fost în contact cu cineva infectat cu HIV sau există riscul de infecție. Generațiile de oameni cu risc de a contracta HIV includ:
- urmează un curs de tratament injectabil timp de o lună;
- întreține relații sexuale fără mijloace speciale de protecție;
- purtători de infecții transmise în timpul contactului sexual;
- pacienții după ce au suferit o transfuzie de sânge sau o injecție pentru a descoperi cauza coagulării sângelui în anii optzeci.
Dacă aveți îndoieli cu privire la statutul dumneavoastră HIV și îngrijorări cu privire la posibilitatea de infectare, este recomandat să solicitați imediat ajutor de la orice instituție medicală din țara noastră pentru a efectua un examen HIV complet. Rezultatele testelor sunt primite în termen de o lună. Persoanele cu risc pentru HIV li se recomandă să fie testate la fiecare 4 luni.
Cum să fii testat
Nu este necesară nicio pregătire specială pentru a face un test de sânge pentru HIV, dar este mai bine respectați cele mai simple reguli:
- Este mai bine să nu mănânci seara, ci să faci testul pe stomacul gol dimineața;
- Nu se recomandă supraîncărcarea corpului cu muncă fizică;
- mâncați alimente sănătoase, abțineți-vă de la țigări și alcool pentru o perioadă;
- Pentru a exclude rezultatele false ale testelor, nu trebuie să faceți testul după tratarea unor boli grave.
