Određivanje krvne grupe standardnim uparenim izohemaglutinirajućim serumima.
1 Uvod: Vršimo krvotipizaciju standardnim serumima u ordinaciji prema preporuci liječnika. Nosim kapu, naočale, masku, ogrtač, pregaču, rukavice. Ruke su prethodno tretirane na higijenski način.
2 Oprema:
Standardni serumi dvije serije
Testirajte krv u epruveti
Pločica za određivanje krvne grupe.
Četiri sterilne staklene šipke (u čaši, Petrijevoj zdjelici)
Izotonična otopina natrijeva klorida (epruveta)
Sterilne pipete 2 kom.
Spremnik s 3% otopinom kloramina.
3 Izvođenje manipulacije
Dodajte kap (0,1 ml) standardnog seruma u zasebne jažice.
Veliku kap krvi stavite na pločicu pokraj jažice 4. skupine, na udaljenosti od najmanje 1 cm od nje.
Odvojenim krajevima staklenih štapića dodajte krv u serum (omjer 10:1), promiješajte
Protresite ploču 5 minuta i promatrajte aglutinaciju.
Dodajte otopinu soli (0,1 ml) u jažice u kojima je došlo do aglutinacije.
Protresite ploču i promatrajte aglutinaciju.
Obrazac za odgovor:
Kod određivanja krvne grupe standardnim serumima
Aglutinacija nije uočena ni u jednoj jažici – prva skupina
Aglutinacija se opaža u prvoj i trećoj jažici - druga skupina
Aglutinacija se opaža u prvoj i drugoj jažici - treća skupina
Aglutinacija se opaža u svim jažicama - vjerojatno četvrta skupina
Rezultat utvrđujemo serumom četvrte skupine (slično)
Obrazac za odgovor:
Sa serumom četvrte skupine ne opaža se aglutinacija - četvrta skupina
Sa serumom četvrte skupine ne opaža se aglutinacija - nemoguće je odrediti krvnu grupu, serum treba zamijeniti.
Nakon manipulacije sve predmete onečišćene krvlju potopite u 3 postotnu otopinu kloramina jedan sat.
4 Moguće greške:
Grube greške:
Nekorištenje zaštitne opreme zdravstvenih radnika.
Ponovno korištenje štapića.
Prebacite štapiće koji su došli u dodir s krvlju preko pladnja s čistim štapićima.
Obrazac aglutinacije ne odgovara zaključku o pripadnosti grupi.
Predmeti u dodiru s krvlju se ne dezinficiraju
Ne-greške:
Vrijeme čekanja na aglutinaciju je manje od 5 minuta.
U jažice u kojima je došlo do aglutinacije nije dodana fiziološka otopina.
Držite štapiće za krajeve, a ne za sredinu.
5 Kriteriji ocjenjivanja:
Položen – bez većih pogrešaka, ne više od dvije manje pogreške.
Nije prošao - prisutnost grešaka, prisutnost više od dvije greške koje nisu greške.
Ako se napravi ozbiljna pogreška, učitelj može tražiti da ponovite odgovarajuću fazu manipulacije. Ako se greška ponavlja, ne uspijevate. Nije dopušteno više od jednog ponavljanja.
Metoda se najčešće koristi u serološkim laboratorijima. Bit metode je određivanje prisutnosti ili odsutnosti antigena skupine A i B u ispitivanoj krvi pomoću standardnih izohemaglutinirajućih seruma, kao i antitijela skupine α i β pomoću standardnih eritrocita. Reakcija sa standardnim serumima provodi se kako je gore opisano.
Reakcija sa standardnim eritrocitima provodi se na sljedeći način.
Potrebna oprema
Oprema za reakciju sa standardnim eritrocitima razlikuje se po tome što zahtijeva standardne eritrocite triju krvnih grupa: 0(I), A(II), B(III). Standardne crvene krvne stanice pripremaju se iz krvi davatelja s prethodno poznatom krvnom grupom i čuvaju na 4-8 °C. Rok trajanja 2-3 dana.
Postupak reakcije
1. Krv za istraživanje uzima se iz vene u suhu epruvetu, centrifugira se ili ostavlja na miru 20-30 minuta da se dobije serum.
2. Na označenu pločicu pipetom se nakapaju tri velike kapi (0,1 ml) ispitivanog krvnog seruma iz epruvete, a pored njih jedna mala kap (0,01 ml) standardnih skupina eritrocita.
3. Daljnje aktivnosti provode se slično metodi s standardnim izohemaglutinirajućim serumima: odgovarajuće kapi se pomiješaju staklenim štapićima, tableta se protrese, promatra 5 minuta, aglutinacijskim kapima se doda izotonična otopina natrijevog klorida, nakon čega se rezultat se procjenjuje.
Tablica 6-3. Evaluacija rezultata presječnog određivanja krvne grupe
Interpretacija rezultata
Procijenite podatke dobivene iz obje reakcije (sa standardnim izohemaglutinirajućim serumima i standardnim eritrocitima - Tablica 6-3).
Osobitost tumačenja rezultata reakcije sa standardnim eritrocitima je da se eritrociti skupine 0 (I) smatraju kontrolnim (ne sadrže antigene, što čini specifičnu reakciju aglutinacije s bilo kojim serumom u osnovi nemogućom).
Rezultat crossover metode smatra se pouzdanim samo ako se pri ocjeni rezultata reakcije sa standardnim izohemaglutinirajućim serumima i standardnim eritrocitima odgovori o ispitivanoj krvnoj grupi podudaraju. Ako se to ne dogodi, treba ponoviti obje reakcije.
Određivanje krvnih grupa monoklonskim antitijelima
Potrebna oprema
Za određivanje krvne grupe koriste se monoklonska protutijela za čiju se proizvodnju koristi biotehnologija hibridoma.
Hibridom je stanični hibrid nastao spajanjem stanice tumora koštane srži (mijeloma) s imunološkim limfocitom koji sintetizira specifična monoklonska protutijela. Hibridoma stječe svojstva oba "roditelja": sposobnost neograničenog rasta, karakterističnu za tumorsku stanicu, i sposobnost sintetiziranja protutijela, karakterističnu za imunološki limfocit.
Tablica 6-4. Shema za ocjenu rezultata određivanja krvnih grupa monoklonskim antitijelima (kolikloni anti-A i anti-B)
Razvijeni su standardni reagensi - monoklonska protutijela: anti-A i anti-B kolikloni, koji se koriste za određivanje aglutinogena eritrocita.
Zolikloni se koriste u obliku liofiliziranog praha crvene (anti-A) ili plave (anti-B) boje, prah se razrijedi izotoničnom otopinom natrijevog klorida neposredno prije studije.
Tehnika reakcije
Anti-A i anti-B zolikloni se nanose na bijelu tabletu, jedna velika kap (0,1 ml) ispod odgovarajućih natpisa: anti-A i anti-B. Uz njih se stavi jedna mala kap (0,01 ml) krvi koja se testira. Nakon miješanja komponenti, reakcija aglutinacije se promatra 2-3 minute.
Interpretacija rezultata
Evaluacija rezultata vrlo je jednostavna (Tablica 6-4).
Metoda određivanja krvne grupe pomoću koliklona omogućuje odustajanje od standardnih izohemaglutinirajućih seruma dobivenih iz krvi davatelja.
Krvne grupe su normalne, nasljeđuju se različite imunološke karakteristike krvi. Na temelju ovih karakteristika svi ljudi se dijele u četiri skupine, bez obzira na rasu, dob i spol. Čovjekova krvna grupa ostaje nepromijenjena tijekom cijelog života. Osobe jedne krvne grupe razlikuju se od osoba drugih krvnih grupa po prisutnosti ili odsutnosti aglutinogena (A i B) sadržanih u crvenim krvnim stanicama i aglutinina α i β sadržanih u serumu.
Krvne grupe sustava AB0: 0(I) krvna grupa sadrži α i β aglutinine, u njoj nema aglutinogena; A (II) krvna grupa - aglutinin α i aglutinogen A; B(III) krvna grupa - aglutinin i aglutinogen B; AB(IV) krvna grupa - sadrži aglutinogene A i B, aglutinina nema.
Primatelj je osoba koja prima transfuziju krvi, darivatelj je osoba koja daje svoju krv za transfuziju. Idealno kompatibilna za primatelja je krv iste grupe. Krv je apsolutno nekompatibilna ako primatelj ima aglutinine na crvenim krvnim stanicama davatelja, jer se u tim slučajevima aglutinogen A jedne krvi spaja s aglutininom druge, ili aglutinogen B s aglutininom β. Razvija se tzv., tj. lijepljenje crvenih krvnih stanica u male i velike grudice. Transfuzija nekompatibilne krvi dovodi do ozbiljnih posljedica i može uzrokovati smrt. Primatelju skupine 0(I) ne može se transfuzirati krv bilo koje druge skupine osim iste. Primatelj skupine AB(IV) nema aglutinina, pa mu se može transfuzirati krv svih skupina. Primatelj grupe AB(IV) je univerzalni primatelj. Krv grupe 0(I) može se transfuzirati osobama bilo koje krvne grupe. Stoga se osobe s grupom 0(I) nazivaju univerzalnim darivateljima.
Osim aglutinogena A i B, ponekad se u eritrocitima nalaze i drugi aglutinogeni (npr. itd.). U slučajevima kada je krv nekompatibilna prema Rh faktoru (vidi), transfuzije se također ne mogu provesti kako bi se izbjegle ozbiljne komplikacije povezane s uništavanjem crvenih krvnih stanica (hemoliza).
Prije svake transfuzije krvi, koja se provodi prema receptu i pod nadzorom liječnika, potrebno je odrediti krvnu grupu i utvrditi njezinu kompatibilnost.
Riža. 1-4. Određivanje krvnih grupa standardnim serumima (A, B, 0).
Riža. 1. Testirajte krvnu grupu 0(I).
Riža. 2. Pretražena krv grupe A (II).
Riža. 3. Pretražena krv grupe B (III).
Riža. 4. Pretražena krv grupe AB (IV).
Metoda određivanja krvnih grupa. Za određivanje krvne grupe pripremite čistu pločicu, staklenu olovku, standardne serume 0(I), A(II) i B(III) krvne grupe, bočice s izotoničnom otopinom natrijevog klorida, alkohola i joda, upijajuću vatu. vune, predmetno stakalce ili staklene štapiće i tri pipete, koje moraju biti suhe (voda uništava).
Ploča je podijeljena olovkom u tri sektora, koji su označeni 0(I), A(I), B(III). Jedna velika kap standardnog seruma krvne grupe 0(I), A(II), B(III) se različitim pipetama nanosi na odgovarajući sektor. Nakon što kap seruma ispusti iz pipete, odmah se spušta u bočicu iz koje je uzet. Prije vađenja krvi prst se obriše alkoholom. Nakon što ste iglom ubrizgali meso prsta, istisnite kap krvi. Pomoću staklenog štapića ili kuta čistog stakalca prenesite tri kapi krvi (svaka veličine glave pribadače) na pločicu pored seruma krvne grupe 0(I), A(II) i B(III). Obilježivši vrijeme na satu, svaki put novim staklenim štapićima, miješajte krv naizmjenično sa serumima krvne grupe 0(I), A(II) i B(III) dok smjesa ne postane jednolično ružičasta. Određivanje krvne grupe provodi se unutar 5 minuta. (paziti na sat). Nakon tog vremena, svakoj kapi smjese doda se jedna kap izotonične otopine natrijeva klorida. Nakon toga se ploča s krvlju lagano zaljulja, naginje u različitim smjerovima tako da se smjesa dobro pomiješa s izotoničnom otopinom natrijevog klorida, ali se ne širi po staklu. Ako je reakcija pozitivna, već u prvim minutama od početka miješanja, čak i prije dodavanja izotonične otopine, u smjesi se pojavljuju sitna crvena zrnca koja se sastoje od zalijepljenih crvenih krvnih zrnaca. Sitna zrnca se spajaju u veća, a ponekad i u ljuskice različite veličine (fenomen aglutinacije). Ako je reakcija negativna, smjesa ostaje jednoliko ružičaste boje. Prilikom provođenja testa s tri gore navedena seruma za svaku krvnu grupu može doći do određene kombinacije pozitivnih i negativnih reakcija (slika 1-4). Ako su sva tri seruma dala negativnu reakciju, tj. sve smjese su ostale jednoliko obojene ružičasto, ispitivana krv pripada skupini 0(I). Ako je samo serum A(I) krvne grupe dao negativnu reakciju, a serumi krvne grupe 0(I) i B(III) dali su pozitivnu reakciju, odnosno u njima su se pojavila zrnca, tada ispitivana krv pripada skupini A(II). ). Ako je serum krvne grupe B(III) dao negativnu reakciju, a serum krvne grupe 0(I) i A(II) pozitivnu, tada ispitivana krv pripada skupini B(III). Kad bi sva tri seruma dala pozitivne reakcije, tj. zrnatost se pojavila posvuda, ispitana krv pripada skupini AB (IV). Sve druge kombinacije ukazuju na pogrešku u definiciji. Uzroci pogrešaka u određivanju krvnih grupa i mjere za njihovo sprječavanje. 1. Višak krvi ako se uzme prevelika kap. Kap krvi bi trebala biti 10 puta manja od kapi seruma. 2. Ako je serum slab ili se crvene krvne stanice subjekta ne lijepe dobro, možete vidjeti aglutinaciju (vidi), budući da reakcija počinje kasno ili je blaga. Potrebno je uzeti pouzdane serume čija je aktivnost ispitana i rok valjanosti im nije istekao. 3. Pri niskim temperaturama okoline može doći do nespecifične hladne aglutinacije – panaglutinacije. Dodatak izotonične otopine natrijevog klorida praćen ljuljanjem ploče obično eliminira hladnu aglutinaciju. Da biste to izbjegli, temperatura okoline ne smije biti niža od 12 i ne viša od 25 °. 4. Duljim promatranjem smjesa se počinje sušiti s periferije, gdje se ponekad pojavljuje zrnatost. Ako u tekućem dijelu smjese nema zrnatosti, možemo govoriti o negativnoj reakciji aglutinacije.
Nakon utvrđivanja krvne grupe, liječnik mora odmah napraviti bilješku na prednjem listu. Nakon završetka rada pločicu, pipete i stakalca treba dobro oprati pod mlazom tople vode, obrisati i staviti u ormar. u ampulama ili bočicama čuvaju se u suhoj i toploj prostoriji u zaključanom ormariću na temperaturi ne višoj od 20°.
Određivanje krvne grupe pomoću standardnih crvenih krvnih stanica (tzv. dvostruka reakcija) koristi se samo u laboratorijima i postajama. U svakodnevnom radu koriste reakciju aglutinacije sa standardnim serumima prema gore opisanoj metodi.
Materijali su objavljeni samo u informativne svrhe i nisu recept za liječenje! Preporučujemo da se obratite hematologu u svojoj zdravstvenoj ustanovi!
Krvna grupa i Rh faktor posebni su proteini koji određuju njegov individualni karakter, baš kao i boja očiju ili kose osobe. Grupa i Rhesus imaju velika vrijednost u medicini u liječenju gubitka krvi, bolesti krvi, a također utječu na formiranje tijela, funkcioniranje organa pa čak i na psihičke karakteristike osobe.
Pojam krvne grupe
Čak su i stari liječnici pokušali nadoknaditi gubitak krvi transfuzijom krvi od osobe do osobe, pa čak i od životinja. U pravilu su svi ti pokušaji imali tužan ishod. I tek početkom XX. stoljeća austrijski znanstvenik Karl Landsteiner je otkrio razlike u krvnim grupama kod ljudi, koje su posebne bjelančevine u crvenim krvnim stanicama - aglutinogeni, odnosno izazivaju reakciju aglutinacije - lijepljenja crvenih krvnih stanica. Upravo je to uzrokovalo smrt pacijenata nakon transfuzije krvi.
Utvrđene su dvije glavne vrste aglutinogena, koje su konvencionalno nazvane A i B. Sljepljivanje crvenih krvnih zrnaca, odnosno nekompatibilnost krvi, nastaje kada se aglutinogen spoji s istoimenim proteinom - aglutininom, koji se nalazi u krvi. plazma, odnosno a i b. To znači da u ljudskoj krvi ne mogu postojati istoimeni proteini koji uzrokuju sljepljivanje crvenih krvnih zrnaca, odnosno ako postoji aglutinogen A, onda u njemu ne može biti aglutinin a.
Također je otkriveno da krv može sadržavati oba aglutinogena - A i B, ali tada ne sadrži nijednu vrstu aglutinina, i obrnuto. Sve su to znakovi koji određuju krvnu grupu. Stoga, kada se istoimeni proteini u crvenim krvnim stanicama i plazmi spoje, dolazi do sukoba krvnih grupa.
Vrste krvnih grupa
Na temelju ovog otkrića kod ljudi su identificirane 4 glavne vrste krvnih grupa:
- 1., koja ne sadrži aglutinogene, ali sadrži i aglutinine a i b, ovo je najčešća krvna grupa, ima je 45% svjetske populacije;
- 2., koji sadrži aglutinogen A i aglutinin b, otkriven je u 35% ljudi;
- 3., koji sadrži aglutinogen B i aglutinin a, ima ga 13% ljudi;
- 4., sadrži i aglutinogene A i B, a ne sadrži aglutinine, ova krvna grupa je najrjeđa, utvrđuje se samo u 7% populacije.
U Rusiji je prihvaćena oznaka krvne grupe prema sustavu AB0, odnosno prema sadržaju aglutinogena u njoj. U skladu s tim, tablica krvnih grupa izgleda ovako:
Krvna grupa je naslijeđena. Može li se vaša krvna grupa promijeniti? Iako je povijest medicine poznata jedini slučaj povezan s genske mutacije. Gen koji određuje krvnu grupu nalazi se u 9. paru kromosoma čovjeka.
Važno! Prosudba o tome koja krvna grupa svima odgovara danas je izgubila na važnosti, kao i koncept univerzalnog darivatelja, odnosno vlasnika 1. (nulte) krvne grupe. Otkrivene su mnoge podvrste krvnih grupa, a transfuzira se samo krv iste vrste.
Rh faktor: negativan i pozitivan
Unatoč Landsteinerovu otkriću krvnih grupa, transfuzijske reakcije nastavile su se događati tijekom transfuzije. Znanstvenik je nastavio istraživanje, te je zajedno s kolegama Wienerom i Levineom uspio otkriti još jedan specifičan protein-antigen eritrocita - Rh faktor. Prvi put je identificiran kod rezus majmuna, po čemu je i dobio ime. Pokazalo se da je Rh prisutan u krvi većine ljudi: 85% stanovništva ima ovaj antigen, a 15% ga nema, odnosno ima negativan Rh faktor.
Osobitost Rh antigena je da kada uđe u krv ljudi koji ga nemaju, potiče proizvodnju anti-Rh antitijela. Pri ponovljenom kontaktu s Rh faktorom ova antitijela daju tešku hemolitičku reakciju, koja se naziva Rh konflikt.
Važno! Kada je Rh faktor negativan, to ne znači samo odsutnost Rh antigena u crvenim krvnim stanicama. U krvi mogu biti prisutna anti-Rh antitijela koja bi mogla nastati u kontaktu s Rh-pozitivnom krvlju. Stoga je analiza prisutnosti Rh protutijela obavezna.
Određivanje krvne grupe i Rh faktora
Krvna grupa i Rh faktor podliježu obveznom određivanju u sljedećim slučajevima:
- za transfuziju krvi;
- za transplantaciju koštane srži;
- prije bilo kakve operacije;
- tijekom trudnoće;
- za bolesti krvi;
- u novorođenčadi s hemolitičkom žuticom (inkompatibilnost rezusa s majkom).
Međutim, u idealnom slučaju, svaka osoba, i odrasli i djeca, trebali bi imati informacije o grupi i Rh pripadnosti. Slučajevi teških ozljeda ili akutna bolest kada krv može biti hitno potrebna.
Određivanje krvne grupe
Određivanje krvne grupe provodi se posebno dobivenim monoklonskim protutijelima po sustavu AB0, odnosno serumskim aglutininima koji uzrokuju lijepljenje crvenih krvnih zrnaca u kontaktu s istoimenim aglutinogenima.
Algoritam za određivanje krvne grupe je sljedeći:
- Pripremite koliklone (monoklonska antitijela) anti-A - ružičaste ampule, i anti-B - ampule plava. Pripremite 2 čiste pipete, staklene štapiće za miješanje i stakalce, jednokratnu špricu od 5 ml za vađenje krvi i epruvetu.
- Krv se vadi iz vene.
- Velika kap zoliklona (0,1 ml) nanese se na predmetno staklo ili posebnu označenu pločicu; male kapi krvi koja se testira (0,01 ml) pomiješaju se s posebnim staklenim štapićima.
- Promatrajte rezultat 3-5 minuta. Kap s miješanom krvlju može biti homogena - minus reakcija (-), ili ispadaju ljuskice - plus reakcija ili aglutinacija (+). Rezultate mora procijeniti liječnik. Mogućnosti testiranja za određivanje krvne grupe prikazane su u tablici:
Određivanje Rh faktora
Određivanje Rh faktora provodi se slično kao i određivanje krvne grupe, odnosno pomoću monoklonskog serumskog protutijela na Rh antigen.
Velika kap reagensa (zoliklon) i mala kap svježe izvađene krvi nanose se na posebnu čistu bijelu keramičku površinu u istom omjeru (10:1). Krv se pažljivo miješa staklenim štapićem i reagensom.
Određivanje Rh faktora zoliklonima traje manje vremena, jer se reakcija javlja unutar 10-15 sekundi. Međutim, potrebno je zadržati maksimalno razdoblje od 3 minute. Kao i kod određivanja krvne grupe, epruveta s krvlju šalje se u laboratorij.
Danas se u medicinskoj praksi naširoko koristi prikladna i brza ekspresna metoda za određivanje pripadnosti skupini i Rh faktora korištenjem suhih koliklona, koji se razrjeđuju sterilnom vodom za injekcije neposredno prije studije. Metoda se zove "Erythrotest-group card", vrlo je prikladna kako u klinikama, u ekstremnim uvjetima, tako iu terenskim uvjetima.
Karakter i zdravlje osobe prema krvnoj grupi
Ljudska krv kao specifično genetsko svojstvo još nije u potpunosti proučena. Posljednjih godina znanstvenici su otkrili varijante krvnih podgrupa, razvijaju nove tehnologije za određivanje kompatibilnosti i tako dalje. Krvi se pripisuje i sposobnost utjecaja na zdravlje i karakter vlasnika. I premda je ovo pitanje i dalje kontroverzno, dugogodišnja promatranja su primijetila zanimljive činjenice
- . Na primjer, japanski znanstvenici vjeruju da je moguće odrediti karakter osobe prema krvnoj grupi:
- vlasnici 1. krvne grupe su jake volje, snažne, društvene i emocionalne osobe;
- vlasnici 2. skupine odlikuju se strpljivošću, skrupuloznošću, ustrajnošću i marljivim radom;
- predstavnici 3. skupine su kreativni pojedinci, ali su u isto vrijeme previše dojmljivi, dominantni i hiroviti;
Što se tiče zdravlja ovisno o krvnoj grupi, smatra se da je ono najjače kod većine populacije, odnosno u 1. skupini. Osobe iz 2. skupine su sklone srčanim bolestima i raku, one iz 3. skupine karakterizira slab imunitet, niska otpornost na infekcije i stres, a predstavnici 4. skupine skloni su kardiovaskularnim patologijama, bolestima zglobova i raku.
Osnova za određivanje krvnih grupa je reakcija aglutinacije, odnosno zgrudnjavanja. Grudice se stvaraju ako uzorak sadrži i aglutinogen A i aglutinin alfa ili aglutinogen B i aglutinin beta, ili oboje u isto vrijeme. Aglutinogeni se nalaze u crvenim krvnim stanicama, a aglutinini su sastojci krvne plazme.
U skladu s tim karakteristikama razlikuju se četiri krvne grupe prema sustavu AB0:
— I (0) – ne sadrži aglutinogene, samo aglutinine;
— II (A) – aglutinin b, aglutinogen A;
— III (B) – aglutinin a, aglutinogen B;
— IV (AB) – sadrži samo aglutinogene.
Jedna od metoda za određivanje krvne grupe je određivanje krvnih grupa standardnim serumima. Standardni serumi sadrže poznate aglutinine: grupe I, II i III. Obratite pažnju na fotografiju ispod, možda će vam biti korisna za bolju percepciju teksta.
Protokol postupka. Algoritam.
Postoje tri sektora. Mogu biti unutar iste ploče ili mogu biti posebne rupe. Sektori su označeni I, II i III, a na svaki se nanosi odgovarajući serum.
Nakon brisanja prsta alkoholom iz pacijenta se iscijedi kap krvi. I stakleni štapić kap po kap prenose u sektore sa serumima. Zatim se krv i serum miješaju do ružičaste boje i bilježi se vrijeme. Reakcija se odvija unutar pet minuta. Treba imati na umu da se pri radu sa svakim sljedećim serumom štapić mijenja kako bi se spriječilo izobličenje rezultata uslijed miješanja seruma. Nakon navedenog vremena u jažice se doda izotonična otopina NaCl i promiješa.
Pozitivan rezultat reakcije izgleda kao crvena zrnca formirana od ljepljivih crvenih krvnih stanica; ako je negativan, smjesa zadržava jednoliku ružičastu boju. Reakcija se odvija unutar 3-4 minute.
Analiza rezultata
Daljnje određivanje krvnih grupa je elementarna kombinatorika. Ako je rezultat u tri jažice negativan, onda je to grupa 0, ako je reakcija provedena samo sa serumima II i I, onda grupa A, samo sa I i III - B, a ako sa oba - onda AB. Sve druge kombinacije su artefakt i ukazuju na pogrešan postupak analize.
Pogreške mogu imati različite razloge. Najčešći su korištenje slabih seruma kojima je istekao rok trajanja; provođenje analize s prevelikom kapi pacijentove krvi - trebala bi biti red veličine manja od količine seruma, nespecifična hladna aglutinacija na temperaturi okoline koja ne odgovara normalnoj i previše dugo vremena izvođenje reakcije. Tijekom sušenja na obodu smjese stvara se zrnatost koja se ne smije uzeti u obzir pri procjeni krvne grupe.
